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想把SVEA Cyano液相色譜柱使用好,把以下這些資料掌握好就行
  • 發(fā)布日期:2022-08-28      瀏覽次數(shù):1264
    •   SVEA Cyano液相色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照液相色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
       
        1.樣品的前處理:
        ①最好使用流動相溶解樣品;
        ②使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì);
        ③使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì);
       
        2.流動相的配制:
        液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此,要求流動相具備以下的特點:
        ①流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中;
        ②流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學反應;
        ③流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時,降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命;
        ④流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應,如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制;
        ⑤流動相沸點不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導致實驗無法進行;
        ⑥在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
       
        3. 流速的選擇:
        因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的SVEA Cyano液相色譜柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。對內(nèi)徑為4.6mm的液相色譜柱,流速一般選擇1mL/min,對于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8mL/min為佳。當選用最佳流速時,分析時間可能延長。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間。
       
        4. 流動相使用注意事項:
        ①由于甲醇廉價,對于反相柱推薦使用甲醇體系;
        ②對于正相柱推薦使用沸程為30-60 ℃的石油醚或提純后的己烷作流動相,沒有提純的己烷不得使用。用水最好使用超純水,去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì),有可能影響分析結(jié)果;
        ③含水流動相最好在實驗前配制,尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要過夜。最好加入NaN3,防止細菌生長;
        ④流動相要求使用0.45μm濾膜過濾,除去微粒雜質(zhì);
        ⑤使用HPLC級溶劑配制流動相,使用合適的流動相可延長SVEA Cyano液相色譜柱的使用壽命,提高柱性能。
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