SVEA Cyano液相色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照液相色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。

 

　　1.樣品的前處理：

　　①最好使用流動相溶解樣品；

　　②使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)；

　　③使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)；

 

　　2.流動相的配制：

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此，要求流動相具備以下的特點：

　　①流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中；

　　②流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)；

　　③流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時，降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命；

　　④流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)，如使用UV檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制；

　　⑤流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實驗無法進(jìn)行；

　　⑥在流動相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

 

　　3. 流速的選擇：

　　因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的SVEA Cyano液相色譜柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。對內(nèi)徑為4.6mm的液相色譜柱，流速一般選擇1mL/min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8mL/min為佳。當(dāng)選用最佳流速時，分析時間可能延長。可采用改變流動相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時間。

 

　　4. 流動相使用注意事項：

　　①由于甲醇廉價，對于反相柱推薦使用甲醇體系；

　　②對于正相柱推薦使用沸程為30-60 ℃的石油醚或提純后的己烷作流動相，沒有提純的己烷不得使用。用水最好使用超純水，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果；

　　③含水流動相最好在實驗前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要過夜。最好加入NaN3，防止細(xì)菌生長；

　　④流動相要求使用0.45μm濾膜過濾，除去微粒雜質(zhì)；

　　⑤使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長SVEA Cyano液相色譜柱的使用壽命，提高柱性能。